2、結果與討論
白酒的生產以泥窖窖池為基礎,窖池中的多種微生物,特別是棲息于酒醅中的微生物左右著酒的產量和品質。酵母菌在原料淀粉質的糖化和酒精的生成,香氣物質的形成等方面都起著重要的作用,是窖池發酵三大菌群之一。
在培養基中添加抗生素等抑菌物質,可以干擾細菌細胞壁的生物合成,減少菌液中細菌含量.從而提高酵母菌分離選育效率。
本實驗采用YPD富集培養基對酵母菌進行富集培養12-24小時,于此時吸取菌液涂布于含有氯霉素的麥芽汁瓊脂培養基,抑制細菌生長,提高酵母分離效率,選取三株單菌落進行劃線,結合鏡檢純化出單菌落酵母菌,斜面低溫保存。
2.1 酵母菌的分析
2.1.1形態與培養特征
(2)液態培養特征
見表2。
(3)細胞形態
見圖2、表3。
2.1.2 碳源同化實驗
三株酵母菌,其中A1能夠同化葡萄糖、麥芽糖、α-乳糖、蔗糖、棉籽糖、半乳糖、淀粉、纖維二糖。A2不能同化α-乳糖,其他幾種糖均能同化。A3不能同化麥芽糖和α-乳糖,其他幾種糖均能同化。
見表4。
2.1.3 氮源同化實驗
三株酵母菌均能同化硫酸銨、硝酸鉀兩種氮源。
見表5。
2.2 酵母菌的發酵
2.2.1酒精含量測定
圖3為三株功能酵母的酒精發酵情況比較。
由表可見,酵母菌A1酒精合成能力最強,其次為酵母菌A2,而酵母菌A3的發酵液中沒有檢測到酒精。由此可見同樣是來自于酒醅中酵母菌,其對白酒產質量的影響是不同的,如何提高出酒率,提高優質品率,還需要對酒醅中的酵母風味物質代謝進行深入研究。
2.2.2 色譜分析
發酵液蒸餾:用干燥100mL容量瓶,準確量取發酵液100mL于500ml蒸餾瓶,用50mL蒸餾水分三次沖洗容量瓶。洗液并入蒸餾瓶。連接蛇形冷卻管,用前述取樣用100mL容量瓶做接收器(外加冰浴),開啟冷卻水緩慢加熱蒸餾,控制蒸餾速度,使蒸餾在30~40min內完成。收集餾出液,將餾出液進行色譜分析。分析結果如下:
見表6。
由表6可知,酵母菌A1具有更好的乙酸乙酯合成能力,而且該能力達到了酵母A2和酵母菌A2的2倍水平;酵母菌A3在合成高級醇方面較酵母菌A1和酵母菌A2強,特別是異戊醇的合成能力,達到了酵母菌A1和酵母A2的2-4倍水平。另一方面,酵母菌顯現了較強的有機酸的合成能力。
總結起來,酵母菌在白酒發酵中起到了至關重要的作用,其主體功能除了合成乙醇外,在乙酸乙酯、高級醇及有機酸的合成方面起到了至關重要的作用,但不同的酵母菌在如上對風味貢獻的水平和能力上存在明顯差異。這在一方面體現了中國白酒釀造體系中酵母的結構多樣性,以及由此而形成的功能多樣性特性。該研究為進一步分析濃香型白酒酵母菌結構與功能奠定了基礎。